comment les endotoxines sont-elles testées?

2019-11-02

Dosage du lysat d’amébocyte lyophilisé (Test LAL) est le test d'endotoxine le plus couramment utilisé. Le lysat d'amibocyte de limule (LAL), c'est-à-dire le lysat d'amibocyte de Tachypleus (TAL), est un type de produit lyophilisé qui contient principalement des amoebocytes extraits du sang bleu du crabe fer à cheval.

LAL réagit avec les endotoxines, petites molécules de lipopolysaccharides (LPS) hydrophobes dérivées de bactéries, qui se localisent dans la membrane cellulaire externe des bactéries à Gram négatif, pour former un caillot de gel quantifiable. Les endotoxines sont mesurées en unités d'endotoxines par millilitre (UE / mL).

La technique turbidimétrique et la technique chromogénique sont également utilisées pour détecter les endotoxines.

Le principe de réaction de la technique chromogénique est le suivant: le lysat d’amébocyte contient une cascade d’enzymes de la sérine protéase (proenzymes) activables par les endotoxines bactériennes. Les endotoxines activent les proenzymes pour produire des enzymes activées (appelées coagulase), cette dernière catalyse la division du substrat incolore en libérant un produit pNA de couleur jaune. Le pNA libéré peut être mesuré par photométrie à 405 nm. Et l'absorbance est positivement corrélée à la concentration en endotoxines, la concentration en endotoxines pouvant être quantifiée en conséquence.

Et le principe de réaction de la technique turbidimétrique est similaire à celui de la technique chromogénique.


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